Вверх
Заказать звонок
Запись
на прием

Молекулярно-генетические исследования

Микроделеции хромосомы Y

К частым генетическим причинам мужского бесплодия относится потеря (делеция) одного или нескольких участков Y-хромосомы, называемых локусами AZF (фактор азооспермии). Гены, расположенные в этих локусах, играют важную роль в процессе сперматогенеза. AZF локус находится в длинном плече Y-хромосомы (Yq11). У 20-30% мужчин с необструктивной азооспермией и у 3-7% мужчин с олигозооспермией выявляют отсутствие (делецию) AZF локуса.

Выявить микроделецию Y хромосомы можно с помощью генетического анализа AZF локуса методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Локусы получили названия AZFa, AZFb и AZFc.Делеции локуса AZFc обнаруживаются значительно чаще, чем AZFa и AZFb. Результаты, полученные после амплификации отрабатываются с помощью системы гель-документирования DigiGenius. Маркеры, используемые для дигностики делеций: sY84, sY127.

Показанием к анализу микроделеций Y хромосомы является значительное снижение концентрации сперматозоидов.

Мутации гена CFTR

Муковисцидоз (МВ) - одно из наиболее распространенных летальных наследственных заболеваний лиц белой расы. Причиной МВ являются мутации гена, который обозначается как муковисцидозный трансмембранный регулятор проводимости (ТРБМ). Наличие мутаций в обеих копиях гена муковисцидоза ведет, как правило, к развитию самого распространенного наследственного аутосомно-рецессивного моногенного заболевания - муковисцидоза. Ген CFTR человека расположен на длинном плече хромосомы 7 в области q31. На данный момент известно более 900 видов различных мутаций гена CFTR. Около семидесяти процентов случаев заболевания муковисцидоза обусловлено делецией трех пар оснований, кодирующих аминокислоту фенилаланин в 508 положении трансмембранного регуляторного белка – delF508(?F508).

Для диагностики данной мутации используется метод ПЦР в реальном времени. Анализ проводиться с помощью системы в реальном времени Applied Biosystems ABI PRISM 7500 Real-Time PCR System.

Синдром ломкой Х хромосомы

Ген FMR1 расположен в локусе Xq27 Х-хромосомы. Нормальный генотип имеет менее 44 триплетов аминокислот цитозин-гуанин-гуанин (CGG) в гене FMR1. Генотип, имеющий 45-200 триплетов CGG, рассматривается как премутация гена FMR1 и связан с низким или нормальным уровнем FMR1-белка. Более 200 триплетов CGG в этом локусе свидетельствует о полной мутации гена. Указанная выше мутация относится к динамическим мутациям. Количественная диагностика CGG-повторов проводится методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Результаты, полученные после амплификации отрабатываются с помощью системы гель-документирования DigiGenius. Диагностика синдрома ломкой Х хромосомы особенно актуальна при выборе кандидатуры донора ооцитов.

Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов методом SCD (semen chromatin dispersion)

Фрагментация ДНК сперматозоидов является причиной мужского бесплодия и отцовского эффекта нарушений раннего эмбрионального развития. Причинами разрывов ДНК считают процессы изменения структуры хроматина в ходе сперматогенеза и апоптоз. Фрагментация ДНК сперматозоидов может оказывать влияние на ранние этапы эмбрионального развития, особенно на формирование бластоцисты и частоту наступления беременности в циклах ЭКО/ИКСИ.

Метод исследования фрагментации ДНК сперматозоидов – метод SCD (semen chromatin dispersion). В норме содержание сперматозоидов, несущих фрагментированную ДНК, не должно превышать 20 %. Фото нормальних сперматозоидов и сперматозоидов с фрагментированной ДНК представлено на рисунке ниже.